Mackenzie Gray wurde in Toronto geboren und wuchs dort auf. Als professioneller Schauspieler seit über 40 Jahren hat er in über 150 Filmen und Fernsehsendungen mitgewirkt. Seit 2017 ist er Hauptdarsteller in der Marvel/FX-Serie Legion (2017), in der er "The Eye" spielt, und wiederkehrender Darsteller in der CW-Serie Riverdale (2016) als "The Pathologist" sowie als "The Time Master" in DC's Legends of Tomorrow (2016).

Seit seinem Umzug nach Vancouver im Jahr 1998 als Hauptdarsteller der Fernsehserie The Net (1998) hat er als Gaststar in zahlreichen in Vancouver oder Calgary gedrehten Produktionen mitgewirkt, zuletzt in der BBC America/Netflix-Serie Dirk Gently's Holistic Detective Agency (2016), Fargo (2014), R.L. Stine's The Haunting Hour (2010), Alcatraz (2012) und Project Mc² (2015). Er kehrte nach Toronto zurück, um in der Serie Bitten (2014) als Gaststar aufzutreten.

Zu seinen Gastauftritten gehören "John Amos" in If There Be Thorns (2015), "David Bowie" in Some Assembly Required (2014), "Lex Luthor" in der 10. Staffel von Smallville (2001), "The Djiin" in Supernatural (2005), "The Observer" im Serienfinale von Fringe (2008), als Teufel in der Gestalt von Keith Richards in R.L. Stine's The Haunting Hour (2010), als ein US-Senator aus dem Süden, der sich gegen Bürgerrechte ausspricht, in der Miniserie The Kennedys (2011) und als Graphic Novelist mit einem dunklen Geheimnis erneut in R.L. Stine's The Haunting Hour (2010).

Weitere Gast- oder Hauptrollen umfassen Arbeiten an den TV-Serien Human Target (2010), Young Blades (2005), Da Vinci's Inquest (1998), The Collector (2004), First Wave (1998), So Weird (1999), Once Upon a Time (2011), True Justice (2010), The Bridge (2010), Sanctuary (2008), Psych (2006), Kyle XY (2006), The L Word (2004), Romeo! (2003), The Twilight Zone (2002), Babylon 5: The Legend of the Rangers: To Live and Die in Starlight (2002), Big Sound (2000), Andromeda (2000), Cold Squad (1998), Voyage of the Unicorn (2001) und Welcome to Paradox (1998).