Одри Тоту родилась 9 августа 1976 года в Бомоне и получила своё имя в честь актрисы Одри Хепбёрн. Отец — Бернар Тоту, врач-стоматолог, мать — Эвелин Нюре, учительница. Когда Одри окончила лицей, родители оплатили ей двухнедельный курс в парижской театральной школе «Cours Florent».

Одри окончила музыкальную школу по классу фортепиано и гобоя. Владеет немецким, итальянским языком и хорошо говорит по-английски.

Попав на актёрские курсы, Одри окончательно решила связать свою жизнь с театром и кино. Переехав в Париж, она училась, работала секретаршей, снималась в телесериале на телеканале TF1 о сыщице Жюли Леско.

Свою первую роль Одри Тоту сыграла в телевизионном фильме «Сердце мишени» (1996), после чего исполнила несколько небольших ролей в телефильмах и телесериалах.