Douglas Henshall est né à Glasgow, en Écosse, en novembre 1965. Sa mère était infirmière et son père représentant de commerce. Il est le plus jeune de trois enfants et a deux sœurs aînées. Il a grandi à Barrhead et a fréquenté le lycée de Barrhead. Pendant ses études, un ami lui a proposé de rejoindre le Scottish Youth Theatre, basé à Glasgow. Après avoir quitté l'école, il s'est installé à Londres pour se former à la Mountview Theatre School. Il est retourné à Glasgow après sa formation, où il a rejoint la compagnie théâtrale 7:84. Finalement, il est retourné vivre à Londres, où il a reçu les éloges de la critique pour son travail théâtral, notamment dans « Life of Stuff » au Donmar Warehouse (1993) et « American Buffalo » au Young Vic (1997). L'un de ses premiers rôles cinématographiques couronnés de succès fut celui d'Edgar dans

Angels and Insects (1995), avant de jouer dans Orphans (1998), The Man with Rain in His Shoes (1998), Lawless Heart (2001) et It's All About Love (2003). Il a également joué dans de nombreuses séries télévisées et est connu pour ses rôles dans

Psychos (1999), Kid in the Corner (1999), Loving You (2003) et Frances Tuesday (2004). Douglas a aussi joué dans des pièces pour la radio de la BBC, notamment le rôle de Roméo dans « Romeo and Juliet » (1999), David dans « The Long Farewell » (2002), Jack Parlabane dans « Bampot Central » (2004) et Richard dans « Richard III » (2004). À l'été 2002, Douglas est retourné sur les scènes londoniennes où il a interprété le rôle de Michael Bakunin dans

la nouvelle trilogie de pièces de Tom Stoppard, « The Coast of Utopia », au National Theatre. En 2004, il a poursuivi son travail théâtral en tenant le rôle principal de John Proctor dans « The Crucible » d'Arthur Miller au Crucible de Sheffield, et celui de Thomas Huxley dans « Darwin in Malibu » de Crispin Whittell, au Hampstead Theatre. En 2005, Douglas a fait ses débuts dans le West End au Lyric, Shaftesbury Avenue, en jouant Biff Loman dans la production acclamée par la critique de la pièce d'Arthur Miller « Death of a Salesman », aux côtés de