John Hopkins Luton'da doğdu ve 1993-1996 yılları arasında Leeds Üniversitesi'nde İngilizce okudu. Lisans öğrencisiyken üniversitenin drama grubuna katıldı ve birçok oyunda yer aldı; sonunda "A Short Play About Sex and Death" oyunundaki performansıyla "Sunday Times" öğrenci-aktör ödülünü kazandı. Böylece tiyatro kimlik bilgileri güçlenen John, London Royal Academy of Dramatic Arts'a kabul edildi ve 2000'de buradan mezun oldu. Neredeyse hemen ardından prestijli Royal Shakespeare Company tarafından işe alındı ve 2001-2002 arasında ilk repertuvar sezonunu burada gerçekleştirdi. Bu sıralarda görünüşü televizyon tekliflerini teşvik etti ve "Love in a Cold Climate" ile "Trial and Retribution 7"deki küçük rollerin ardından, tiyatro izleyicisi olmayanların onu en iyi tanıdığı rol olan, giderek ağırlaşan ama popüler İngiliz polisiye dizisi Midsomer Murders'ta (1997) Çavuş Scott rolünü teklif edildi ve kabul etti.

Hakkını teslim etmek gerekirse, 2004-2005 sezonundan sonra diziden ayrıldı ve 2006-2007 sezonunda hem Londra hem de Stratford-upon-Avon'da Royal Shakespeare Company'ye dönerek 'Antony and Cleopatra'da Patrick Stewart'ın karşısında Caesar'ı oynadı. Daha yakın zamanda sahne rolleri arasında Patrick Barlow'un 'The 39 Steps'in dört kişilik komedi versiyonunda Richard Hannay, Shakespeare's Globe'ta yeni 'Holy Warriors' oyununda I. Richard ve The Guardian'ın "Hopkins'in en iyi Shakespeare aktörlerimizden biri olduğunu doğruluyor" dediği 'Much Ado About Nothing'de Benedick yer aldı. Televizyona döndüğünde 'Stan Lee's Lucky Man'de bir kötü adamdı ve BBC dizisi 'Poldark'ın iki sezonunda Sir Francis Basset'i oynadı. The Times (Londra) gazetesinin 2020 tarihli bir makalesinde 'şu anda sahnedeki en iyi 10 İngiliz aktörden biri' olarak gösterildi.