Kristen Johnston estudió actuación en la Atlantic Theater Company Acting School en la ciudad de Nueva York.

Ganó dos premios Emmy por su papel en 3rd Rock from the Sun (1996). Ha aparecido en muchos otros programas de televisión, como Ugly Betty (2006), ER (1994), Bored to Death (2009) y, quizás de manera más memorable, como la chica fiestera cuyas famosas últimas palabras fueron "I'm so bored I could die" en Sex and the City (1998). Actualmente, en televisión, está en la exitosa serie de TV Land, The Exes (2011), que ahora está en su cuarta temporada. Solo algunos de los muchos créditos teatrales de Johnston son "So Help Me God!" (nominación al Drama Desk), "The Women", "Aunt Dan & Lemon", "Love Song" en el West End, así como protagonizar tres producciones de "Shakespeare in Central Park", "Much Ado About Nothing", "12th Night" y "The Skin of our Teeth". Es miembro desde hace mucho tiempo de The Atlantic Theater Company, y sus papeles a lo largo de los años han incluido "The Lights" (nominación al Drama Desk) y "Scarcity". Los créditos cinematográficos de Kristen incluyen Austin Powers: The Spy Who Shagged Me (1999), la segunda película de Austin Powers (como "Ivana Humpalot"), Finding Bliss (2009), Bad Parents (2012), Bride Wars (2009), L!fe Happens (2011), Vamps (2012), Strangers with Candy (2005) y la próxima película independiente, Lovesick (2014), con Matt LeBlanc. Johnston enseña actuación en la Acting School de The Atlantic Theater Company en la NYU. Fundó una organización llamada SLAM, cuyo objetivo es la creación de una escuela secundaria para sobrios muy necesaria en la ciudad de Nueva York. El primer libro de Johnston fue unas memorias superventas del New York Times, tituladas "GUTS: the endless follies and tiny triumphs of a giant disaster".